摘要：
一、中国药典2015规定
0512高效液相色谱法规定如下：品种正文项下规定的条件除填充剂种类、流动相组分、检测器类型不得改变外，其余如色谱柱内径与长度、填充剂粒径、流动相流速、流动相组分比例、柱温、进样量、检测器灵敏度等，均可适当改变，以达到系统适用性试验的要求。调整流动相组分比例时，当小比例组分的百分比例X小于33%时，允许改变范围为0.7X 〜1.3X ;当X大于33%时，允许改变范围为X —10%〜X+ 10%。
由上文可知，中国药典专论方法除填充剂种类、流动相组分（比例调整在规定范围内）、检测器类型不得改变外，其他条件改变了，还是认为是药典方法。但中国药典没有规定方法确认之说，所以，即使是中国药典方法，也是应该按分析方法验证的相关规定进行全套的方法验证。
二、美国药典41规定
USP41 <621>CHROMATOGRAPHY
为符合系统适用性的要求而调整的操作条件是允许的，除非专论项下另有规定，下面为所列的最大的可调范围，这些调整需要额外的确认数据。为确认新条件对方法的适用性，评估调整对相关分析性能特征存在的潜在影响。多条件的调整，将对系统性能产生累积影响，实施前需仔细考虑。
1、pH of mobile phase(HPLC):
2、Concentration of salts in buffer (HPLC):
3、Ratio of componentsin mobile phase (HPLC):
流动相中组分（≤50%）可以在此比例上再调节±30%，且任一组分比例的调节不应超过±10%（相对于总的流动相），含三组分的流动相的调节可以分组分进行，含双组分的流动相的调节可在最小的组分进行，双组份和三组分的调节实例如下：
双组分：例如流动相50:50，其中一组分50%的30%是15%，但是它超过了占总体比例±10%的规定，所以这个流动相比例的调节范围应以±10%为限，可以在不超过40:60~60:40的范围之间调节。再例如流动相比例为2:98，其中小组分2%的30%是0.6%，这个值不超过占总体比例±10%的规定，此流动相的比例可以在不超过1.4:98.6~2.6:97.4的范围之间调节。
三组分：例如流动相60:35:5，它的次组分35%的30%是10.5%，但是它超过了占总体比例±10%的规定，所以这个流动相比例中的次组分的调节范围应以±10%为限。对于最小组分5%的30%是1.5%。可以在不超过50:45:5~70:25:5或58.5:35:6.5~61.5:35:3.5的范围之间调节。
4、Wavelength ofUV-visible detector (HPLC):
5、Stationary phase
Column length(GC):可以在±70%范围内调节。
Column length(HPLC):见粒径项下。
Column inner diameter(HPLC):如果线速度保持恒定，可以调整。见HPLC流速。
Column inner diameter(GC):最大可调整至±50%。
Film thickness(capillaryGC):最大可在−50% to100%调整。
6、Particle size(HPLC):
7、Particle size (GC):
8、:
9、Flow rate (HPLC)：
F2=F1×[(dc22×dp1)/(dc12×dp2)]
其中：
F1=专论中规定的流速；
对于等度洗脱，如果粒度从≥3μm变化到＜3μm时，将增加线速度（通过调整流速），如果柱效不下跌20%以上，相同地，如果粒度从＜3μm变化到≥3μm时，应减少线速度（流速）来避免柱效降低20%以上。梯度洗脱：流速、柱内径、粒度将不允许调整。另外，流速可以在±50%调整。（只适用于等度洗脱）
三、欧洲药典9规定
EP 2.2.46 ChromatographicSeparation Techniques规定如下：
1、液相色谱-等度洗脱
（1）Composition of themobile phase
（2）pH of the aqueouscomponent of the mobile phase
（3）Concentration ofsalts in the buffer component of a mobile phase
（4）Flow rate：
（5）Column parameters：
Stationary phase：固定相的属性不能改变（例如：不能用C8来代替C18）；
particle size：最多可减小50%，不允许增加。
Column dimensions:
F2=F1×[(dc22×dp1)/(dc12×dp2)]
其中：
F1=专论中规定的流速，ml/min；
（6）Temperature：
（7）Detector wavelength
（8）Injection volume
2、-梯度洗脱
梯度洗脱的液相条件调节需比等度洗脱的更加慎重。流动相的组成/梯度洗脱可以在符合下述条件的前提下进行小范围的调节：
满足系统适应性的条件；
主峰的出峰时间在原定保留时间的±15%以内；
流动相中最终组分的洗脱能力的强度不得弱于原规定组分；
如果系统适应性的条件达不到，则通常首选考虑滞留体积或更换柱子。
（1）Dwell volume
式中：
D：滞留体积，ml；
D0：方法开发时的滞留体积，ml；
F：流速ml/min。
如果方法的验证没有包括该步骤，用于上述目的的等度的描述可以被省略。
（2）pH of the aqueouscomponent of the mobile phase
（3）Concentration of salts in the buffer component of a mobile phase
（4）Flow rate
（5）Column parameters
Stationary phase固定相：固定相的属性不能改变（例如：不能用C8来代替C18）；
particle size粒径，不允许调节。
Column dimensions柱尺寸：长度可以±70%范围内调节，内径可在±25%范围内调节。当柱的尺寸改变时，流速按照下面的公式进行计算并调节。
（6）Temperature
（7）Detector wavelength
（8）Injection volume
3、Gas chromatography气相色谱
（1）Column parameters柱参数
Stationary phase固定相：粒径最多可减少50%，不允许增加（填充柱）。膜厚可以在-50%~+100%范围内调节（毛细管柱）。
Column dimensions柱尺寸：色谱柱长度可以±70%范围内调节，色谱柱内径可以在±50%范围内调节。
（2）Flow rate流速（GC）
（3）Temperature柱温（GC）
（4）Injection volumeand split volume进样体积和分流比
USP与EP规定的可调范围基本一致，相较于梯度洗脱，EP药典更加谨慎，基本上不允许进行过多的调整。此外药典方法，EP与USP均要求进行方法确认，并且明确指出，药典方法可以不进行全套的验证。USP<1226>及FDA指南均有药典方法确认的相关指导，小编将接着为大家介绍。
