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请问多步骤细胞培养时的PDL如何计算?
请问多步骤细胞培养时的PDL如何计算?
比如细胞培养从细胞复苏(假设P1,工作细胞为P0)到接毒前终末细胞(假设P5),总共传代5次,那么第P5代的PDL如何计算,是一步步计算,还是整体计算,以PDL(P5)举例计算如下:
一步步计算:PDL(P5)=PDL(P0)+log2
(N1末/N1始)
+log2
(N2末/N2始)
+log2
(N3末/N3始)
+log2
(N4末/N4始)
+log2
(N5末/N5始)
。
整体计算:PDL(P5)=PDL(P0)+log2
(N5末/N1始)
。
注:“Nx始”为该步骤接种时的细胞数量,“Nx末”为该步骤培养结束时的细胞数量,“PDL(P0)”为工作细胞的PDL代次。
问题1:我们每次传代的时候,如果上步骤有多的细胞会废弃,这部分舍弃的细胞其实在传代过程中产生了代次,但是在整体计算时,却没有该废弃细胞的代次。一步一步计算时包含了舍弃细胞产生的代次,导致两种计算结果不一致,结果整体计算时的PDL要低于一步步计算时的PDL,所以这里建议是按照一步一步来计算更合适么?
问题2:如果某步骤有多个容器平行培养,该PDL如何计算,比如P4有三个容器培养(由一个P3分成了三个容器),P5对应的也有三个容器,那P4、P5的PDL如何计算,是分成三条线计算还是整体计算更合适,由于同一个步骤不同的容器培养存在差异,导致两种计算结果不一样?
我理解的三条线平行计算:PDL(P4-1)=PDL(P3)+log2
(N4-1末/N4-1始)
,PDL(P4-2)=PDL(P3)+log2
(N4-2末/N4-2始)
,PDL(P4-3)=PDL(P3)+log2
(N4-3末/N4-3始)
我理解的整体计算(不分容器):PDL(P4)=PDL(P3)+log2
(N4-1末+N4-2末+N4-3末)/(N4-1始+N4-2始+N4-3始)
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